酸性磷酸酯酶产生菌培养条件的优化及酶活的检测
酸性磷酸酯酶产生菌培养条件的优化及酶活的检测(任务书,开题报告,外文翻译,论文11700字)
摘 要
实验室通过菌种筛选得到一株酸性磷酸酯酶高产菌株ANT-B01（实验室命名），经Biolog鉴定该菌株为Aspergillus niger v.tiegham BGB。经研究工程菌ANT-B01的最适发酵温度为28℃左右，最适发酵PH为5.6左右。以ANT-B01作为出发菌株进行磷酸苯二钠诱导，大大提高了该菌株的产酶量，其酶活整整提高了6倍，达到了1338.8.5U/mL。该酶水解磷酸苯二钠的最适温度为45℃左右，最适PH为5.2左右，酶促反应最大反应速度为Vm=0.033mmol/min，米氏常数Km=0.64mmol/L。
关键词：菌种筛选 黑曲霉 酸性磷酸酯酶 酶活
An acid PHosPHatase Producing Strain optimization of culture conditions and activity detection
ABSTRACT
In our laboratory , an Acid phosphatase overproducing strain is screened ,named as ANT-B01 (Lab named) . This strain is identified as Aspergillus niger by biolog .After sduding ,we find out that the engineering bacteria ANT-B01’most suitable temperature is about 28℃,most favorable fermentation PH is about 5.6 . Using ANT-B01 as starting strain ,Disodium phenyl phosPHate can induce enhancing it’s amount of Enzeme production .It’s enzyme activity increases fully 6-fold ,reaching 1338.8U/mL .The Enzeme’s most suitable temperature is about 45℃ ,most favorable PH is about 5.2 ,hydrolysising Disodium phenyl phosphate .Maximam speed of Emzymatic reactions is Vm=0.033mmol/min,Michaelis constant Km=0.64mmol/L。 [来源：http://Doc163.com]
Key words: Strain screening ；Aspergillus niger；Acid phosphatase ；Enzyme activity
[资料来源：www.doc163.com]
目录
摘 要 I
ABSTRACT II
第一章 文献综述 1
1.1 酸性磷酸酯酶简介 1
1.2 研究酸性磷酸酯酶的目的和意义 1
1.3 研究酸性磷酸酯酶的发展趋势 1
第二章 酸性磷酸酯酶产生菌的筛选及鉴定 3
2.1实验材料 3
2.1.1试剂 3
2.1.2实验仪器 4
2.2方法 5
2.2.1菌株的分离与筛选 5
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2.2.2酸性磷酸酯酶酶活力测定 6
2.2.3 菌种鉴定 8
2.3结果与讨论 9
2.3.1 酸性磷酸酯酶产生菌的筛选 9
2.3.2 酶活力测定结果 10
2.3.3菌种鉴定结果 11
2.4本章小结 13
第三章 ANT-B01菌株产酶条件优化 14
3.1实验材料 14
3.1.1试剂 14
3.1.2实验仪器 14
3.2方法 14
3.2.1菌种和培养基 14
3.2.2 产酶条件与方法 14
3.3结果与讨论 15
3.3.1 PH对生长的影响 15
3.3.2 PH对菌体产酶影响 15
3.3.3磷酸苯二钠对菌体生长的影响 16
3.3.4磷酸苯二钠对发酵产酶的影响 16
3.4本章小结 18
第四章 酸性磷酸酯酶粗酶性质研究 19
4.1实验材料 19 [资料来源：https://www.doc163.com]
4.1.1试剂 19
4.1.2实验仪器 20
4.2方法 20
4.2.1酸性磷酸酯酶粗酶液的制备 20
4.2.2酶促反应进程曲线的制作 20
4.2.3酸性磷酸酯酶米氏常数的测定 21
4.2.4考马斯（Comessie)亮蓝结合法测定蛋白质浓度 23
4.3结果与讨论 24
4.3.1结果 24
4.3.2讨论 28
4.4本章小结 28
第五章 酸性磷酸酶的分离纯化 29
5.1实验材料 29
5.1.1试剂 29
5.1.2实验仪器 29
5.2实验方法 30
5.2.1 粗酶液的预处理 30
5.2.2 酶液的过柱分离 30
5.3结果与讨论 30
5.3.1 酶液的过柱图谱如下图 30
5.3.2 讨论 30
5.4本章小结 30 [资料来源：http://www.doc163.com]
第六章 结论与展望 31
6.1结论 31
6.2 展望 31
参考文献 32
致 谢 33 [资料来源：http://doc163.com]