敬钊毒素JTZX-III突变体(M1M2M3)基因的重组表达与鉴定
敬钊毒素JTZX-III突变体(M1M2M3)基因的重组表达与鉴定(毕业论文5700字)
摘要:敬钊缨毛蛛分布于广西海南等地。JZTX-III是该蜘蛛的毒液成分中的一种主要成分。为了研究该毒素与离子通道的分子机制,本实验对JZTX-III进行定点突变,以JZTX-III的突变体(M1,M2,M3)为主要目的基因构建表达载体pVT102U/α后再转化至酿酒酵母S-78组成的真核表达系统进行表达鉴定。实验内容包括表达载体构建和转化;酵母发酵表达;及表达产物的分离纯化三个部分。
关键词: 载体pVT102U/α, 酵母S-78 突变体
RECOMBINANT EXPRESSION AND IDENTIFICATION OF JZTX-III’S MUTANTS(M1, M2 ,M3)
Abstract:JingZhaotoxin spider The spider‘s Chilobrachys jingzhao is found in Guangxi and Hainan. JZTX-III is the spider's venom components of a major component. In order to study the toxin and the molecular mechanism of ion channels, the experiments carry out on JZTX-III mutants (M1, M2, M3) as the main target gene expression vector immigration pVT102U / α and then transferred to yeast S-78 eukaryotic expression system composed of to express identification. The contents include the recambinant vector construction and transformation; yeast fermentation; and Purification of the supernatant of theculture.
Keyword:pVT102U/α Saccharomyces Cerevisiae strain S-78 mutant
[资料来源:http://doc163.com]
目 录
摘 要 1
关键词 1
1前言 1
2材料与方法 2
2.1真核表达质粒与菌株 3
2.2 试剂 3
2.3 主要实验仪器 3
2.4 真核表达培养基 4
2.5 引物设计 4
2.6 PCR扩增基因 4
2.7毒素基因的克隆 4
2.8酵母感受态细胞的制定 5
2.9质粒转入载体试剂 5
2.10 蛋白的表达 5
2.11 蛋白的纯化 5
2.12 质谱鉴定 6
3结果与分析 6
3.1JZTX-III及其突变体的载体构建 6
3.2多肽表达及纯化 7
3.3 质谱鉴定 7
4讨 论 8 [来源:http://Doc163.com]
参考文献 9
致谢 11
[来源:http://Doc163.com]